目的 探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)作为新型重组干扰素mix基因的载体治疗结肠癌的可行性.方法 制备携带mix基因的腺病毒pDC359-mix+ F35;分离培养CIK细胞;腺病毒Ad5-EGFP、Ad11-EGFP和Ad35-EGFP以感染复数(MOI)=100时感染CIK细胞24、48 h后观察感染效率;腺病毒pDC359-mix+ F35以MOI=0、1、10、100、1000感染CIK细胞2、4、6、8d,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中干扰素mix表达量;磺酰罗丹明B(SRB)显色法检测浓度为0.001、0.01、0.1、1、10μg/L的干扰素mix和干扰素α-2b对结肠癌细胞株HT29和SW480的抑制作用;乳酸脱氢酶释放法(LDH)检测效靶比为3∶1、10∶1的CIK和CIK-mix对HT29和SW480的杀伤作用.结果 腺病毒pDC359-mix+ F35成功制备,MOI=100,感染48 h后对CIK细胞的感染效率可达80%以上;当MOI=100时,各时间段干扰素mix的表达量均达到(8.96±2.10)ng以上;当浓度为10 μg/L,干扰素mix对结肠癌细胞株抑制率分别为72.8%和70.1%,而干扰素α-2b分别为30.4%和28.6%;腺病毒pDC359-mix+ F35感染CIK后,CIK-mix对HT29和SW480的杀伤作用均比CIK增强了20%以上.结论 表达干扰素mix的CIK细胞体外能够发挥联合的抗肿瘤效应.
作者:陈艳;刘辉;于丽;付玉华;王敬晗;钱其军
来源:中华实验外科杂志 2011 年 28卷 12期