目的 建立一种骨髓间充质干细胞(BMSCs)培养新方法,以避免因使用异种血清培养带来的伦理学争议、传播疾病和潜在抗原性等问题,同时满足细胞对各类生长因子的需求.方法 经兔耳中央动脉取血并制备富血小板血浆(PRP).从兔髂骨抽取骨髓,富集BMSCs,分为PRP组、胎牛血清(FBS)组和无血清组,分别采用10％ PRP、10％ FBS与无血清,配比DMEM-F12培养.观察各组细胞形态、检测细胞增殖活性并绘制生长曲线、表型表达和碱性磷酸酶(ALP)活性.结果 3组细胞均在接种后24h左右开始贴壁,并由圆形逐步变为梭形、多角形和不规则形等.3组细胞生长曲线均呈“S”形,PRP组与FBS组增殖明显快于无血清组(P＜0.01),PRP组增殖快于FBS组(P＜0.05).第4代PRP组与FBS组CD44阳性率分别为88.73％和85.66％、CD90为84.32％和87.58％,均呈阳性表达；CD34为12.38％和14.76％、CD45为10.47％和11.82％,均呈阴性表达.FBS组和无血清组第1～5代ALP活性相似；但PRP组随着传代而逐渐升高,第4、5代ALP活性(6.42±0.89) U/100 ml,(7.02 ±0.92) U/100 ml显著高于其第1、2代(4.27±0.74) U/100ml,(4.70 ±0.76) U/100 ml(P ＜0.01),以及高于第4、5代FBS组和无血清组(P＜0.01).结论 自体PRP能有效促进BMSCs增殖,细胞形态、增殖活性及表型与FBS组基本一致；

作者：马志兵；袁峰；冯虎；金培生

来源：中华实验外科杂志 2011 年 28卷 12期