背景与目的:人Yq11.2上AZF区(内含DAZ基因家族)的缺失是多数男性不育的病因.本研究旨在探讨DAZ3基因导入精子的可能性以及导入基因在2-细胞胚中的功能.材料和方法:构建pIRES2-EGFP-DAZ3质粒,经鉴定无误后将其导入金黄地鼠精子.将携带DAZ3基因的精子与金黄地鼠卵母细胞进行体外受精.用FISH、PCR、RT-PCR技术分别检测DAZ3基因在精子头部、雄原核上的整合以及在2-细胞胚中的复制与表达.结果:构建的pIRES2-EGFP-DAZ3质粒经酶切、PCR和绿色荧光蛋白表达鉴定构建成功.采用FISH在精子头部、单细胞胚雄原核和2-细胞胚两个间期核上观察到阳性杂交信号.采用RT-PCR在2-细胞胚样本中观察到DAZ3 cDNA的特异条带.结论:外源性DAZ3基因能被导入精子基因组.携带DAZ3基因的精子可与卵母细胞完成正常的受精过程.导入的DAZ3基因在早期胚胎细胞中能够随细胞分裂自我复制并表达其功能.本研究结果为DAZ基因缺失所致男性不育的治疗提供了新的线索.
作者：徐珊珊；黄天华；谢庆东；吴丛梅；吴德生
来源：癌变·畸变·突变 2006 年 18卷 3期
