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背景与目的:制备抗兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶[NADP(H)-dependent retinol dehydrogenase/reductase,NRDR]的单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性.材料与方法:以基因工程重组兔NRDR为抗原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术建立稳定分泌兔NRDR mAb的细胞株.以间接ELISA法筛选阳性克隆、鉴定Ig亚类、细胞培养上清及腹水效价,同时采用Western blot方法检测mAb的特异性.结果:获得3株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞(NR1、NR2和NR5).其抗体亚类均为IgG1,细胞培养上清效价依次为1∶20、1∶40和1∶20,腹水效价分别为1∶106、1∶107和1∶106.Western blot结果显示NR1、NR2和NR5抗体均能有效识别兔肝组织中的NRDR及重组表达的兔NRDR.结论:成功地建立了稳定分泌兔NRDR mAb的杂交瘤细胞株,为NRDR生物学功能的进一步研究打下了基础.

作者:杜牡丹;宋旭红;刘戈飞;梁斌;张巧霞;李蕊;谢健平;甘雪琼;黄东阳

来源:癌变·畸变·突变 2008 年 20卷 3期

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作者:
杜牡丹;宋旭红;刘戈飞;梁斌;张巧霞;李蕊;谢健平;甘雪琼;黄东阳
来源:
癌变·畸变·突变 2008 年 20卷 3期
标签:
兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶 单克隆抗体 杂交瘤
背景与目的:制备抗兔辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶[NADP(H)-dependent retinol dehydrogenase/reductase,NRDR]的单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性.材料与方法:以基因工程重组兔NRDR为抗原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术建立稳定分泌兔NRDR mAb的细胞株.以间接ELISA法筛选阳性克隆、鉴定Ig亚类、细胞培养上清及腹水效价,同时采用Western blot方法检测mAb的特异性.结果:获得3株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞(NR1、NR2和NR5).其抗体亚类均为IgG1,细胞培养上清效价依次为1∶20、1∶40和1∶20,腹水效价分别为1∶106、1∶107和1∶106.Western blot结果显示NR1、NR2和NR5抗体均能有效识别兔肝组织中的NRDR及重组表达的兔NRDR.结论:成功地建立了稳定分泌兔NRDR mAb的杂交瘤细胞株,为NRDR生物学功能的进一步研究打下了基础.