目的:检测肺癌细胞系H1299细胞中DENN/MADD domain containing 2D (DENND2D)基因过表达对顺铂细胞毒性的影响,并初步探讨其机制.方法:应用瞬时和稳定转染两种方法使H1299细胞外源过表达DENND2D基因,以空载体组作为对照组,应用CCK-8比色法检测不同浓度顺铂作用下H1299细胞的存活情况,据此计算出IC 值.利用Western blot方法检测外源过表达50DENND2D的H1299细胞多聚ADP核糖聚合酶 [poly (ADP-ribose) polymerase-1,PARP1]的表达情况.利用顺铂处理外源过表达DENND2D的H1299细胞,并检测不同处理时间点 (0、1、2、4和8 h)H1299细胞多聚ADP核糖[poly (ADP-ribose),PAR]的表达情况.结果:顺铂对外源过表达DENND2D基因的H1299细胞毒性明显高于空载体组 (IC 值降低,P＜0.05).外源过表达DENND2D的50H1299细胞PARP1蛋白和PAR蛋白的表达均比空载体对照组低,且空载体对照组PAR的表达随时间推移呈上升趋势,而外源过表达DENND2D组则呈下降趋势.结论:DENND2D可能通过对PARP1的调控增强了顺铂对肺癌细胞系H1299的细胞毒性.
作者：凌兵；冯林；程书钧
来源：癌变·畸变·突变 2013 年 25卷 2期
