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目的:构建哈萨克族食管上皮细胞DNA甲基转移酶1(DNMT1)高表达细胞株模型.方法:将构建的WV0133、WV0132和WV072质粒转染至哈萨克族食管上皮细胞,利用嘌呤霉素对DNMT1高表达细胞进行筛选,并通过荧光显微镜、实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot法检测细胞转染情况和目的基因DNMT1的表达情况.结果:WV0133和WV0132质粒转染组细胞DNMT1mRNA表达水平是正常细胞组的1.786倍和2.721倍,DNMT1蛋白表达水平是正常细胞组的2.734倍和3.100倍,均显著高于正常细胞组(P<0.01).其中,WV0132质粒转染组细胞DNMT1 mRNA和蛋白表达水平较高.结论:成功构建了哈萨克族食管上皮DNMT1高表达细胞株模型,为深入研究食管癌的发生机制提供了研究工具.

作者:陈艳;张慧霞

来源:癌变·畸变·突变 2016 年 28卷 6期

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作者:
陈艳;张慧霞
来源:
癌变·畸变·突变 2016 年 28卷 6期
标签:
DNA甲基转移酶1 食管上皮细胞 哈萨克族 TALE技术 DNA methyltransferase 1 esophageal epithelial cell Kazakh TALEs
目的:构建哈萨克族食管上皮细胞DNA甲基转移酶1(DNMT1)高表达细胞株模型.方法:将构建的WV0133、WV0132和WV072质粒转染至哈萨克族食管上皮细胞,利用嘌呤霉素对DNMT1高表达细胞进行筛选,并通过荧光显微镜、实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot法检测细胞转染情况和目的基因DNMT1的表达情况.结果:WV0133和WV0132质粒转染组细胞DNMT1mRNA表达水平是正常细胞组的1.786倍和2.721倍,DNMT1蛋白表达水平是正常细胞组的2.734倍和3.100倍,均显著高于正常细胞组(P<0.01).其中,WV0132质粒转染组细胞DNMT1 mRNA和蛋白表达水平较高.结论:成功构建了哈萨克族食管上皮DNMT1高表达细胞株模型,为深入研究食管癌的发生机制提供了研究工具.