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目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthtase,eNOS)基因局部转基因表达对小血管吻合口血栓形成的影响.方法 大鼠30只,随机分为实验组和对照组,切断大鼠双侧股动脉,行原位端端吻合,并向吻合口血管腔内注入真核表达载体pcDNA3.0-eNOS质粒与脂质体 Lipofectin 2000的混合溶液(实验组)或真核表达载体pcD-NA3.0质粒与脂质体Lipofectin 2000的混合溶液(对照组),使之在腔内滞留30 min.术后d 5在两组中随机各取5只大鼠,切取以吻合口为中心,长1.5 cm股动脉,将其分成3等份,每份0.5 cm,分别行RT-PCR、Western blotting和组织化学法检测以了解eNOS表达情况.其余大鼠于术后14d处死,切取以吻合口为中心0.5 cm长血管段行病理形态学检测.结果 试验组RT-PCR在591 bp处出现明显条带;Western blotting检测试验组eNOS含量分别为0.517±0.140,明显高于对照组0.248±0.062.;组织化学法检测试验组一氧化氮(nitric oxide,NO)含量(7.6±0.3)μmol/L,明显高于对照组(2.4±0.2)μmol/L.实验组吻合口血栓出现率明显低于对照组(P<0.01).结论 脂质体介导的携带eNOS基因的真核表达载体可以在小血管吻合口中成功表达,并且能有效地防止小血管吻合口血栓的形成.

作者:章有才;尹宗生;张胜权;王伟

来源:安徽医科大学学报 2009 年 44卷 3期

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作者:
章有才;尹宗生;张胜权;王伟
来源:
安徽医科大学学报 2009 年 44卷 3期
标签:
基因疗法 血栓栓塞/预防和控制
目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthtase,eNOS)基因局部转基因表达对小血管吻合口血栓形成的影响.方法 大鼠30只,随机分为实验组和对照组,切断大鼠双侧股动脉,行原位端端吻合,并向吻合口血管腔内注入真核表达载体pcDNA3.0-eNOS质粒与脂质体 Lipofectin 2000的混合溶液(实验组)或真核表达载体pcD-NA3.0质粒与脂质体Lipofectin 2000的混合溶液(对照组),使之在腔内滞留30 min.术后d 5在两组中随机各取5只大鼠,切取以吻合口为中心,长1.5 cm股动脉,将其分成3等份,每份0.5 cm,分别行RT-PCR、Western blotting和组织化学法检测以了解eNOS表达情况.其余大鼠于术后14d处死,切取以吻合口为中心0.5 cm长血管段行病理形态学检测.结果 试验组RT-PCR在591 bp处出现明显条带;Western blotting检测试验组eNOS含量分别为0.517±0.140,明显高于对照组0.248±0.062.;组织化学法检测试验组一氧化氮(nitric oxide,NO)含量(7.6±0.3)μmol/L,明显高于对照组(2.4±0.2)μmol/L.实验组吻合口血栓出现率明显低于对照组(P<0.01).结论 脂质体介导的携带eNOS基因的真核表达载体可以在小血管吻合口中成功表达,并且能有效地防止小血管吻合口血栓的形成.