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目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)对α-干扰素(IFN-α)诱导抗病毒蛋白表达的影响及其机制.方法 以人肝胚瘤细胞株HepG2为研究对象,将能够表达完整HBV病毒颗粒的质粒pSM2转染HepG2细胞,再将0~1 000 IU/ml浓度IFN-α处理细胞6 h,运用ELISA和Southern blot技术分析转染细胞上清HBV抗原和细胞内HBV DNA以判断HBV复制情况;以Northern blot技术分析转染前后HepG2细胞的IFN-α应答情况,检测抗病毒蛋白(如MxA、2′,5′-OAS等),并进一步分析IFN-α JAK-STAT信号转导途径分子STAT1的表达.结果 转染HBV全基因组序列表达质粒pSM2的HepG2细胞能够表达完整的HBV颗粒,且随着转染时间的延长,HBV颗粒或抗原表达量逐步增加.Northern blot分析提示HepG2细胞能够表达IFN-α抗病毒蛋白:MxA、2′,5′-OAS,但转染pSM2质粒的HepG2细胞,IFN-α抗病毒蛋白 MxA、2′,5′-OAS表达量明显减低;同时重要的IFN-α JAK-STAT信号转导途径分子STAT1表达也随着HBV颗粒的表达而受到抑制.结论 HBV可能通过下调IFN-α JAK-STAT信号转导途径分子STAT1的表达,从而抑制抗病毒蛋白如MxA、2′,5′-OAS的表达,这很可能是HBV拮抗IFN-α抗病毒活性的重要机制之一.

作者:管世鹤;杨凯;潘颖

来源:安徽医科大学学报 2011 年 46卷 4期

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作者:
管世鹤;杨凯;潘颖
来源:
安徽医科大学学报 2011 年 46卷 4期
标签:
肝炎病毒,乙型 干扰素α STAT1转录因子
目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)对α-干扰素(IFN-α)诱导抗病毒蛋白表达的影响及其机制.方法 以人肝胚瘤细胞株HepG2为研究对象,将能够表达完整HBV病毒颗粒的质粒pSM2转染HepG2细胞,再将0~1 000 IU/ml浓度IFN-α处理细胞6 h,运用ELISA和Southern blot技术分析转染细胞上清HBV抗原和细胞内HBV DNA以判断HBV复制情况;以Northern blot技术分析转染前后HepG2细胞的IFN-α应答情况,检测抗病毒蛋白(如MxA、2′,5′-OAS等),并进一步分析IFN-α JAK-STAT信号转导途径分子STAT1的表达.结果 转染HBV全基因组序列表达质粒pSM2的HepG2细胞能够表达完整的HBV颗粒,且随着转染时间的延长,HBV颗粒或抗原表达量逐步增加.Northern blot分析提示HepG2细胞能够表达IFN-α抗病毒蛋白:MxA、2′,5′-OAS,但转染pSM2质粒的HepG2细胞,IFN-α抗病毒蛋白 MxA、2′,5′-OAS表达量明显减低;同时重要的IFN-α JAK-STAT信号转导途径分子STAT1表达也随着HBV颗粒的表达而受到抑制.结论 HBV可能通过下调IFN-α JAK-STAT信号转导途径分子STAT1的表达,从而抑制抗病毒蛋白如MxA、2′,5′-OAS的表达,这很可能是HBV拮抗IFN-α抗病毒活性的重要机制之一.