目的：分别构建 HPV16 E5、E6和 E7癌基因的重组慢病毒载体感染人口腔上皮细胞，为研究 E5基因对口腔上皮细胞的致癌机制奠定基础。方法克隆 HPV16 E5、E6和E7基因，分别构建 pLVX－AcGFP－E5、 pLVX－AcGFP－E6和pLVX－AcGFP－E7重组慢病毒载体，与包装质粒共转染293T细胞。收集3种慢病毒上清液，分别感染口腔上皮细胞、腺嘌呤素筛选感染细胞，RT－PCR 和 Western blot 法检测目的基因的表达。结果成功构建 pLVX－AcGFP－E5、pLVX－AcGFP－E6和 pLVX－AcGFP－E7重组慢病毒载体，获得3种慢病毒上清液，筛选得到3个稳定的细胞株。 RT－PCR 和 Western blot均可检测到 HPV16 E5、E6和 E7基因在口腔上皮细胞内表达。结论本研究构建的3个重组慢病毒载体能成功感染口腔上皮细胞。
作者：项先旺；江彤；陈传俊
来源：安徽医科大学学报 2016 年 51卷 7期
