目的 体外检测miR-210基因诱导犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨和成血管方向分化的作用,探讨目的基因双重调控作用.方法 构建慢病毒载体Lenti-miR-210和Lenti-LacZ,并分别用Lenti-LacZ和Lenti-miR-210转染BM-SCs.分别在目的基因转染BMSCs的第0、1、4、7、14、21天提取mRNA和蛋白,利用RT-PCR和Western blot检测关键性成血管和成骨因子[血管内皮生长因子(VEGF)和核心结合因子2 (Runx2)]的表达.同时在目的基因转染的第21天通过碱性磷酸酶(ALP)和钙结节茜素红染色观察体外骨形成的情况.结果 慢病毒载体Lenti-miR-210和Lenti-LacZ能够成功转入BMSCs中,并在目的基因转染后,miR-210能够显著上调BMSCs关键性成骨和成血管因子VEGF和Runx2的表达(P＜0.05);碱性磷酸酶和茜素红染色显示,相对于BMSCs组和Lenti-LacZ组,Lenti-miR-210组能够明显促进BMSCs的成骨向分化.结论 miR-210可以显著促进BMSCs向成骨和成血管方向分化,这为将来的体内实验奠定了基础.
作者：王默涵；邹多宏；周咏；吴轶群；朱艳秋；何家才
来源：安徽医科大学学报 2016 年 51卷 9期
