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目的 探讨胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)过表达保护低氧/无血清(H/SD)诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡的机制.方法 体外分离培养大鼠MSCs,利用H/SD诱导MSCs凋亡,构建CSE基因的慢病毒表达载体pLV-ZsGreen-CSE lentivirus及空载体pLV-ZsGreen lentivus并感染MCSs(分别记为CSE MSCs、GFP MSCs).设立正常培养的MSCs(Norm MSCs组)、CSE MSCs组、GFP MSCs组,PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测CSE、Bcl-2、Bax及细胞色素c(Cyt c)蛋白的表达.结果 与Norm MSCs组及GFP MSCs组相比,CSE MSCs组CSE蛋白表达显著增高(P<0.01),在H/SD 12 h状态下,CSEMSCs组凋亡率显著降低(P<0.01),CSEMSCs组Bcl-2蛋白表达水平显著高于GFP MSCs组及Norm MSCs组(P<0.01),CSEMSCs组Bax蛋白表达水平显著低于GFP MSCs组及NormMSCs组(P<0.01);CSEMSCs组线粒体Cyt c蛋白表达水平显著高于GFPMSCs组及NormMSCs组(P<0.01),CSEMSCs组胞质Cyt c蛋白表达水平显著低于GFP MSCs组及Norm MSCs组(P<0.01).NormMSCs与GFPMSCs组上述指标比较,差异均无统计学意义.结论 CSE过表达保护H/SD诱导MSCs凋亡,其机制与抑制线粒体凋亡途径有关.

作者:李从圣;王爱玲;杨静;郝玉瑜;郭增

来源:安徽医科大学学报 2017 年 52卷 1期

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作者:
李从圣;王爱玲;杨静;郝玉瑜;郭增
来源:
安徽医科大学学报 2017 年 52卷 1期
标签:
骨髓间充质干细胞 胱硫醚-γ-裂解酶 凋亡 机制 mesenchymal stem cells cystathionine gamma-lyase apoptosis mechanism
目的 探讨胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)过表达保护低氧/无血清(H/SD)诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡的机制.方法 体外分离培养大鼠MSCs,利用H/SD诱导MSCs凋亡,构建CSE基因的慢病毒表达载体pLV-ZsGreen-CSE lentivirus及空载体pLV-ZsGreen lentivus并感染MCSs(分别记为CSE MSCs、GFP MSCs).设立正常培养的MSCs(Norm MSCs组)、CSE MSCs组、GFP MSCs组,PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测CSE、Bcl-2、Bax及细胞色素c(Cyt c)蛋白的表达.结果 与Norm MSCs组及GFP MSCs组相比,CSE MSCs组CSE蛋白表达显著增高(P<0.01),在H/SD 12 h状态下,CSEMSCs组凋亡率显著降低(P<0.01),CSEMSCs组Bcl-2蛋白表达水平显著高于GFP MSCs组及Norm MSCs组(P<0.01),CSEMSCs组Bax蛋白表达水平显著低于GFP MSCs组及NormMSCs组(P<0.01);CSEMSCs组线粒体Cyt c蛋白表达水平显著高于GFPMSCs组及NormMSCs组(P<0.01),CSEMSCs组胞质Cyt c蛋白表达水平显著低于GFP MSCs组及Norm MSCs组(P<0.01).NormMSCs与GFPMSCs组上述指标比较,差异均无统计学意义.结论 CSE过表达保护H/SD诱导MSCs凋亡,其机制与抑制线粒体凋亡途径有关.