目的 构建重组人免疫球蛋白D-Fc(IgD-Fc)片段蛋白,检测IgD受体(IgDR)在健康人CD4+T细胞和T淋巴瘤细胞株Jurkat、MOLT-4上的表达情况,检测IgD-Fc与IgD竞争结合CD4+T细胞表面IgDR的能力.方法 采用PCR法得到人IgD-Fc目的基因,经原核蛋白表达和层析纯化,制备出重组人IgD-Fc片段蛋白.流式细胞术检测IgDR在健康人CD4+T细胞和T淋巴瘤细胞株Jurkat、MOLT-4上的表达情况,以及IgD、重组人IgD-Fc片段蛋白与CD4+T细胞表面IgDR的竞争结合情况.结果 成功构建含IgD-Fc基因片段的原核表达载体pET28a(+)/IgD-Fc,得到重组人IgD-Fc片段蛋白.CD4+T细胞及T淋巴瘤细胞株表面IgDR与IgD亲和力相近,重组人IgD-Fc片段蛋白可与IgD竞争性结合IgDR.结论 重组人IgD-Fc片段蛋白工艺成熟稳定,可与IgD竞争性结合IgDR,可能成为针对IgD水平升高的自身免疫性疾病的新型治疗药物.
作者：张静；陈文生；胡晓曦；黄琼；吴育晶；魏伟
来源：安徽医科大学学报 2019 年 54卷 4期
