目的 探讨低氧诱导因子-1 (HIF-1α)对大鼠主动脉内皮细胞通透性的影响及作用机制.方法 构建HIF-1α干扰及过表达载体,应用Lipofectamine 2000转染原代大鼠主动脉内皮细胞,浓度为200 μg/ml遗传霉素(G418)筛选稳转细胞株,实时荧光定量PCR (RT-PCR)和Western blot检测HIF-1α、内皮素-1(ET-1)、内皮素受体A(ETA)、内皮素受体B(ETB)和闭锁小带(ZO-1)的表达;应用ET-1信号通路抑制剂BQ123及BQ788预处理HIF-1 α过表达细胞株1h,RTPCR和Westem blot检测HIF-1α、ET-1、ETA、ETB和ZO-1的表达,细胞膜通透性实验检测单层内皮细胞膜通透系数变化.结果 与转染短发夹RNA-阴性对照组(shRNA-NC组)相比,转染shRNA-Ⅱ组HIF-1 α、ET-1、ETA、ETB mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P＜0.01),ZO-1的表达则明显升高(P＜0.01).与转染GV230组比较,稳转GV230/HIF-1α组HIF-1α、ET-1、ETA、ETB mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P＜0.01),ZO-1的表达则明显降低(P＜0.01);同时细胞膜通透性系数亦明显升高(P＜0.01);应用BQ123和BQ788处理能够抑制HIF-1α诱导的ETA和ETB表达、增强ZO-1的表达,同时细胞膜通透性系数明显降低(P＜0.01).结论 HIF-1α可通过上调ET-1的表达进而增加大鼠主动脉内皮细胞的通透性,HIF-1 α/ET-1信号轴在调控烧伤

作者：蒋智永；胡子健；孟承颖；黄海良；段声梁；蒋薇；王欢；余又新；孙业祥；方林森；胡德林

来源：安徽医科大学学报 2019 年 54卷 7期