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目的 研究胸主动脉平滑肌瞬时受体电位离子通道(TRPC)家族C1/C4/C5三个亚型与大电导钙激活钾通道(BKCa)蛋白相互作用差异,阐明TRPC1/C4/C5通道在激动剂引起的胸主动脉平滑肌收缩中的作用.方法 采用瞬时转染小干扰RNA(siRNA)敲低昆明小鼠胸主动脉平滑肌组织中TRPC1、TRPC4、TRPC5蛋白表达并用免疫蛋白印迹实验检测其表达水平改变情况;通过离体血管实验检测内皮素1引起的血管收缩改变;采用免疫共沉淀实验检测TRPC1/C4/C5通道蛋白与BKCa蛋白相互作用情况.结果 瞬时转染特异性TRPC1/C4/C5 siRNA显著敲低昆明小鼠胸主动脉平滑肌中TRPC1/C4/C5蛋白表达;在内皮素1引起的胸主动脉环收缩中,TRPC1或TRPC5 siRNA处理组较对照组血管收缩显著增强,但TRPC4siRNA处理组较对照组血管收缩显著减弱;免疫共沉淀结果显示,TRPC1可以共沉淀TR-PC4、TRPC5和BKCa,同时,TRPC4可以共沉淀TRPC1,TR-PC5可以共沉淀TRPC1、BKCa,但TRPC4不能共沉淀BKCa.结论 TRPC1可以与TRPC4或TRPC5蛋白在小鼠胸主动脉平滑肌中组成异聚体通道,并且TRPC1-TRPC5两种蛋白组成的异聚体通道和BKCa形成钙信号复合物调节血管平滑肌收缩.

作者:陈良余;毛雨;周扬;费亮;王健;周利民;范涛涛;沈兵

来源:安徽医科大学学报 2019 年 54卷 10期

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作者:
陈良余;毛雨;周扬;费亮;王健;周利民;范涛涛;沈兵
来源:
安徽医科大学学报 2019 年 54卷 10期
标签:
大电导钙激活钾通道 瞬时受体电位通道 血管平滑肌 内皮素1 TRPC
目的 研究胸主动脉平滑肌瞬时受体电位离子通道(TRPC)家族C1/C4/C5三个亚型与大电导钙激活钾通道(BKCa)蛋白相互作用差异,阐明TRPC1/C4/C5通道在激动剂引起的胸主动脉平滑肌收缩中的作用.方法 采用瞬时转染小干扰RNA(siRNA)敲低昆明小鼠胸主动脉平滑肌组织中TRPC1、TRPC4、TRPC5蛋白表达并用免疫蛋白印迹实验检测其表达水平改变情况;通过离体血管实验检测内皮素1引起的血管收缩改变;采用免疫共沉淀实验检测TRPC1/C4/C5通道蛋白与BKCa蛋白相互作用情况.结果 瞬时转染特异性TRPC1/C4/C5 siRNA显著敲低昆明小鼠胸主动脉平滑肌中TRPC1/C4/C5蛋白表达;在内皮素1引起的胸主动脉环收缩中,TRPC1或TRPC5 siRNA处理组较对照组血管收缩显著增强,但TRPC4siRNA处理组较对照组血管收缩显著减弱;免疫共沉淀结果显示,TRPC1可以共沉淀TR-PC4、TRPC5和BKCa,同时,TRPC4可以共沉淀TRPC1,TR-PC5可以共沉淀TRPC1、BKCa,但TRPC4不能共沉淀BKCa.结论 TRPC1可以与TRPC4或TRPC5蛋白在小鼠胸主动脉平滑肌中组成异聚体通道,并且TRPC1-TRPC5两种蛋白组成的异聚体通道和BKCa形成钙信号复合物调节血管平滑肌收缩.