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目的 探讨骨髓间充质干细胞条件培养液(BMSC-CM)对神经干细胞(NSCs)分化的影响及Notch1信号通路在其中的作用.方法 在不同分化条件下培养NSCs,通过Notch1信号激活剂Jagged分析是否存在Notch1信号通路的作用.实验分为四组:对照组(NSCs)、Jagged组(NSCs+1μg/ml Jagged)、BMSC-CM组(NSCs+BMSC-CM)、BMSC-CM+Jagged组(NSCs+BMSC-CM+1μg/ml Jagged).用免疫荧光染色法鉴定各组NSCs的分化情况,Western blot法检测MAP-2、GFAP及通路相关蛋白Notch1、NICD、Hes1、Hes5的表达量.结果 免疫荧光分析显示:与对照组相比,BMSC-CM组神经元特异性微管相关蛋白-2(MAP-2)阳性细胞数明显增多,星形胶质细胞特异性胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞数明显减少,在Jagged组中这种现象完全相反.关于Notch1、NICD、Hes1、Hes5蛋白的表达量,Jagged组明显高于对照组,BMSC-CM组明显低于对照组,BMSC-CM+Jagged组明显低于Jagged组,BMSC-CM+Jagged组明显高于BMSC-CM组.结论 BMSC-CM通过抑制Notch1通路促进神经干细胞在体外的有效分化,增加MAP-2阳性细胞比例,减少GFAP阳性细胞比例.

作者:童祎;宋旆文;申才良;刘晓颖

来源:安徽医科大学学报 2019 年 54卷 12期

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作者:
童祎;宋旆文;申才良;刘晓颖
来源:
安徽医科大学学报 2019 年 54卷 12期
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神经干细胞 骨髓间充质干细胞条件培养基 Notch1信号通路
目的 探讨骨髓间充质干细胞条件培养液(BMSC-CM)对神经干细胞(NSCs)分化的影响及Notch1信号通路在其中的作用.方法 在不同分化条件下培养NSCs,通过Notch1信号激活剂Jagged分析是否存在Notch1信号通路的作用.实验分为四组:对照组(NSCs)、Jagged组(NSCs+1μg/ml Jagged)、BMSC-CM组(NSCs+BMSC-CM)、BMSC-CM+Jagged组(NSCs+BMSC-CM+1μg/ml Jagged).用免疫荧光染色法鉴定各组NSCs的分化情况,Western blot法检测MAP-2、GFAP及通路相关蛋白Notch1、NICD、Hes1、Hes5的表达量.结果 免疫荧光分析显示:与对照组相比,BMSC-CM组神经元特异性微管相关蛋白-2(MAP-2)阳性细胞数明显增多,星形胶质细胞特异性胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞数明显减少,在Jagged组中这种现象完全相反.关于Notch1、NICD、Hes1、Hes5蛋白的表达量,Jagged组明显高于对照组,BMSC-CM组明显低于对照组,BMSC-CM+Jagged组明显低于Jagged组,BMSC-CM+Jagged组明显高于BMSC-CM组.结论 BMSC-CM通过抑制Notch1通路促进神经干细胞在体外的有效分化,增加MAP-2阳性细胞比例,减少GFAP阳性细胞比例.