目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy)对Caco-2细胞通透性的影响及其机制.方法 Caco-2结肠癌细胞分为空白对照组、Hcy处理组(10、20、50μmol/L)、Hcy+不同抑制剂处理组(ERK抑制剂PD98059、MLCK抑制剂ML-7、P38MAPK抑制剂SB203580、Ca2 +/Calmodulin抑制剂KN62、Rho抑制剂Y27632及PKC抑制剂Staurosporine).通过检测跨上皮电流阻抗(TEER)及异硫氰酸荧光素(FITC)跨膜转运量评估Caco-2细胞模型通透性,Western blot法检测Caco-2细胞中MEK、ERK、MLCK、p-ERK、p-MLCK、ZO-1、Occludin、Claudin-1及Claudin-2蛋白表达水平.结果 与空白对照组相比,使用50 μmol/L Hcy预处理的Caco-2细胞通透性改变速率最快.Claudin-1、Occludin、ZO-1表达降低,MEK、ERK、MLCK、p-ERK、p-MLCK、Claudin-2蛋白表达升高.与Hcy处理组相比,使用ML-7及PD98059处理Caco-2细胞,可减弱Hcy预处理引起的Caco-2细胞通透性增加,降低MEK、ERK、MLCK、p-ERK、p-MLCK、Claudin-2蛋白表达,提高Claudin-1、Occludin及ZO-1蛋白表达.结论 Hcy可能通过MEK-ERK-MLCK细胞信号通路,调控细胞紧密连接(TJ)相关蛋白表达,影响Caco-2细胞通透性.

作者：姚成云；丁少桢；杨青；刘晓昌；徐张巍；梅俏；许建明

来源：安徽医科大学学报 2020 年 55卷 1期