目的 制备针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAbs)并鉴定其生物学特性.方法 利用大肠杆菌原核表达重组SARS-CoV-2 N蛋白,通过杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经重组蛋白免疫的BALB/c小鼠的脾细胞进行融合,采用间接ELISA法和有限稀释法筛选出阳性杂交瘤细胞株,并鉴定其亚型,腹水法制备mAbs,Protein G亲和柱纯化后通过SDS-PAGE、间接ELISA和Western blot检测其纯度、效价及特异性.结果 获得5株能稳定分泌抗SARS-CoV-2 N蛋白mAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为N1～5.通过腹水法制备获得5个mAbs,亚型鉴定结果显示1个为IgG2a?κ型、4个为IgG1?κ型,其效价均达到2×104以上.Western blot结果表明5个mAbs都能与重组SARS-CoV-2 N蛋白结合.结论 通过杂交瘤技术成功制备了5个能特异性识别重组SARS-CoV-2 N蛋白的mAbs,为开发免疫诊断试剂奠定了基础.
作者：刘江丽；李盈盈；王佳雯；许喻鈞；张艳；黄江涛；胡祖权；曾柱
来源：安徽医科大学学报 2022 年 57卷 3期
