目的 探究视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)截短体p100Rb和p80Rb对细胞周期、凋亡的影响.方法 构建pcDNA3.1-p100 Rb-FLAG、pcDNA3.1-p80 Rb-FLAG真核表达质粒;分别转染至U2OS细胞中,进行免疫荧光制片,检测p100Rb和p80Rb细胞定位情况;将pcDNA3.1-RB1-FLAG、p100 Rb和p80 Rb分别转染至HEK 293T细胞中,提取总蛋白进行免疫印迹,检测Rb、p100 Rb和p80 Rb的过表达;过表达Rb、p100 Rb和p80 Rb后利用流式细胞术检测细胞周期、凋亡.结果 成功构建pcD-NA3.1-p100 Rb-FLAG和pcDNA3.1-p80 Rb-FLAG真核表达质粒;在U2OS细胞中p100Rb主要定位在细胞核,p80Rb主要定位在细胞质;Rb、p100Rb和p80Rb在HEK 293T细胞中可过表达;过表达Rb、p80 Rb和p100 Rb后,与对照组比较,过表达的Rb实验组和p100 Rb实验组细胞周期G1期百分比升高,各实验组细胞的凋亡率均显著降低(均P<0.05).结论 过表达p100Rb可抑制HEK 293T细胞凋亡且阻滞细胞周期;过表达p80Rb可抑制HEK 293T细胞凋亡但对细胞周期无影响.
作者：李强；李彩红；周恒；乔兵；刘建军；范礼斌
来源：安徽医科大学学报 2022 年 57卷 9期
