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目的 研究糖化低密度脂蛋白(Gly-LDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的炎症损伤及Toll样受体4(TLR4)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,并探讨其可能的机制.方法 体外培养HUVECs,实验分为对照组、阳性对照组[50 mg/L普通低密度脂蛋白(n-LDL)]、Gly-LDL(50、75、100 mg/L)组.CCK-8法测定细胞增殖情况;划痕实验测定细胞迁移能力;ELISA法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)分泌水平;qRT-PCR测定TLR4、HIF-1α、TNF-α、IL-6 mRNA水平;Western blot测定TLR4、HIF-1α、TNF-α、IL-6蛋白水平;分别用TLR4、HIF-1α 的si-RNA干预Gly-LDL对HUVECs的作用,实验分为对照组、模型组(Gly-LDL 100 mg/L)、si-TLR4组(Gly-LDL 100 mg/L+si-TLR4)、TLR4空载组(Gly-LDL 100 mg/L+si-NC1)、si-HIF-1α组(Gly-LDL 100 mg/L+si-HIF-1α)和HIF-1α 空载组(Gly-LDL 100 mg/L+si-NC2).Western blot法检测TLR4、HIF-1α蛋白表达水平,验证TLR4、HIF-1α 相互作用关系.结果 Gly-LDL(50、75、100 mg/L)组均可抑制HUVECs的增殖及迁移能力(P<0.01),刺激HUVECs中炎症细胞因子TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1分泌量增加(P<0.001),上调TLR4、HIF-1α、TNF-α、IL-6 m

作者:邱军辉;刘美志;孙杜桑;潘婷;赵维维;沙雯君;鲁郡;雷涛

来源:安徽医科大学学报 2022 年 57卷 10期

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邱军辉;刘美志;孙杜桑;潘婷;赵维维;沙雯君;鲁郡;雷涛
来源:
安徽医科大学学报 2022 年 57卷 10期
标签:
糖化低密度脂蛋白 人脐静脉内皮细胞 Toll样受体4 缺氧诱导因子-1α
目的 研究糖化低密度脂蛋白(Gly-LDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的炎症损伤及Toll样受体4(TLR4)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,并探讨其可能的机制.方法 体外培养HUVECs,实验分为对照组、阳性对照组[50 mg/L普通低密度脂蛋白(n-LDL)]、Gly-LDL(50、75、100 mg/L)组.CCK-8法测定细胞增殖情况;划痕实验测定细胞迁移能力;ELISA法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)分泌水平;qRT-PCR测定TLR4、HIF-1α、TNF-α、IL-6 mRNA水平;Western blot测定TLR4、HIF-1α、TNF-α、IL-6蛋白水平;分别用TLR4、HIF-1α 的si-RNA干预Gly-LDL对HUVECs的作用,实验分为对照组、模型组(Gly-LDL 100 mg/L)、si-TLR4组(Gly-LDL 100 mg/L+si-TLR4)、TLR4空载组(Gly-LDL 100 mg/L+si-NC1)、si-HIF-1α组(Gly-LDL 100 mg/L+si-HIF-1α)和HIF-1α 空载组(Gly-LDL 100 mg/L+si-NC2).Western blot法检测TLR4、HIF-1α蛋白表达水平,验证TLR4、HIF-1α 相互作用关系.结果 Gly-LDL(50、75、100 mg/L)组均可抑制HUVECs的增殖及迁移能力(P<0.01),刺激HUVECs中炎症细胞因子TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1分泌量增加(P<0.001),上调TLR4、HIF-1α、TNF-α、IL-6 m