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目的 探讨抗血小板溶栓素(APT)对原培养大鼠皮质神经细胞缺糖缺氧损伤的保护作用及其机制.方法 大鼠原代皮质神经细胞培养6 d后,经APT 80μg/mL、40μg/mL、20μg/mL、Toll样受体4(TLR4)阻断剂HTA12510μg/mL预处理24 h,皮质神经细胞缺糖缺氧3 h,恢复正常培养24 h,建立缺糖缺氧再灌注损伤模型.实验分为正常组,模型组,APT低、中、高组,HTA组.倒置显微镜下观察细胞形态,免疫组化染色鉴定神经元.MTT法检测细胞存活率.比色法检测细胞培养液中丙二醛(MDA)含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性.G-LISA法检测细胞中Rho蛋白A(RhoA)活性,Western-bloting检测细胞中TLR4、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)蛋白表达水平.结果 细胞培养6 d后,免疫组化鉴定显示神经细胞纯度达90

作者:贾德武;罗胜勇

来源:安徽医学 2016 年 37卷 3期

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作者:
贾德武;罗胜勇
来源:
安徽医学 2016 年 37卷 3期
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抗血小板溶栓素 神经细胞 Toll样受体4 Rho蛋白A Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1/2 Anti-platelet thrombolysin Neuron Toll like receptor 4 RhoA Rho associated coiled coil forming protein kinase 1/2
目的 探讨抗血小板溶栓素(APT)对原培养大鼠皮质神经细胞缺糖缺氧损伤的保护作用及其机制.方法 大鼠原代皮质神经细胞培养6 d后,经APT 80μg/mL、40μg/mL、20μg/mL、Toll样受体4(TLR4)阻断剂HTA12510μg/mL预处理24 h,皮质神经细胞缺糖缺氧3 h,恢复正常培养24 h,建立缺糖缺氧再灌注损伤模型.实验分为正常组,模型组,APT低、中、高组,HTA组.倒置显微镜下观察细胞形态,免疫组化染色鉴定神经元.MTT法检测细胞存活率.比色法检测细胞培养液中丙二醛(MDA)含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性.G-LISA法检测细胞中Rho蛋白A(RhoA)活性,Western-bloting检测细胞中TLR4、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)蛋白表达水平.结果 细胞培养6 d后,免疫组化鉴定显示神经细胞纯度达90