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目的 探索环磷酰胺作用非霍奇金淋巴瘤对抑癌基因PTEN的影响,为治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤寻找新治疗途径提供实验依据.方法 免疫沉淀(IP)技术提取细胞中的PTEN蛋白,采用高效液相色谱(HPLC)法分别检测不同时间(10、30、60min)不同浓度的环磷酰胺(0、25、50 μmol·L-1)作用Namalwa细胞株时PTEN基因的活性;Western-blot技术检测PTEN,磷酸化PTEN,Akt及磷酸化Akt的表达;基因芯片技术筛选环磷酰胺作用Namalwa细胞后基因表达谱的改变;q-PCR技术检验基因谱表达的改变.结果 不同浓度的环磷酰胺作用Namalwa细胞后PTEN活性降低;Western-blot结果显出磷酸化PTEN及磷酸化Akt表达降低;基因芯片筛选发现上调的基因有13个,下调的基因有16个.环磷酰胺作用B细胞非霍奇金淋巴瘤Namalwa细胞后引起基因表达谱广泛改变.对差异基因的分析得出环磷酰胺作用Namalwa细胞引起基因表达谱重要信号通路上基因的改变.结论 环磷酰胺治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤具有较低的缓解率,可能与环磷酰胺作用细胞使PTEN基因活性减弱,同时引起信号通路上基因表达改变有关.

作者:何伟;葛自力;刘世杰;祝华珺

来源:安徽医药 2017 年 21卷 10期

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何伟;葛自力;刘世杰;祝华珺
来源:
安徽医药 2017 年 21卷 10期
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环磷酰胺 B细胞非霍奇金淋巴瘤 PTEN基因 活性 Cyclophosphamide B cell non-Hodgkin's lymphoma PTEN gene Activity
目的 探索环磷酰胺作用非霍奇金淋巴瘤对抑癌基因PTEN的影响,为治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤寻找新治疗途径提供实验依据.方法 免疫沉淀(IP)技术提取细胞中的PTEN蛋白,采用高效液相色谱(HPLC)法分别检测不同时间(10、30、60min)不同浓度的环磷酰胺(0、25、50 μmol·L-1)作用Namalwa细胞株时PTEN基因的活性;Western-blot技术检测PTEN,磷酸化PTEN,Akt及磷酸化Akt的表达;基因芯片技术筛选环磷酰胺作用Namalwa细胞后基因表达谱的改变;q-PCR技术检验基因谱表达的改变.结果 不同浓度的环磷酰胺作用Namalwa细胞后PTEN活性降低;Western-blot结果显出磷酸化PTEN及磷酸化Akt表达降低;基因芯片筛选发现上调的基因有13个,下调的基因有16个.环磷酰胺作用B细胞非霍奇金淋巴瘤Namalwa细胞后引起基因表达谱广泛改变.对差异基因的分析得出环磷酰胺作用Namalwa细胞引起基因表达谱重要信号通路上基因的改变.结论 环磷酰胺治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤具有较低的缓解率,可能与环磷酰胺作用细胞使PTEN基因活性减弱,同时引起信号通路上基因表达改变有关.