目的 探讨微小RNA-16(miR-16)抑制高糖诱导人视网膜内皮细胞凋亡的分子机制.方法 将人视网膜内皮细胞在正常葡萄糖培养基(5 mmol/L)或高葡萄糖培养基(30 mmol/L)中培养3 d.然后用miR-16模拟物(50 nmol/L)转染细胞48 h.使用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)验证miRNA表达水平.通过蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、胰岛素受体底物-1丝氨酸307(IRS-1 Ser307)、磷酸化的IRS-1 Ser307、细胞因子信号转导负调控因子(SOCS3)、胰岛素受体Tyr1150(IR Tyr1150)、磷酸化的IR Tyr1150、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化的Akt和cleaved caspase 3的蛋白表达水平.结果 与正常葡萄糖组相比,高葡萄糖培养的人视网膜内皮细胞中miR-16的表达水平明显降低[对照组(1.07±0.08)比高糖组(0.35±0.03),t=14.43,P=0.011],TNF-α、SOCS3和cleaved caspase的蛋白表达水平及IRS-1 Ser307的磷酸化水平明显升高,而IRTyr1150和Akt的磷酸化水平明显降低.然而,转染miR-16模拟物则可逆转高糖培养基对上述因子的影响.结论 miR-16通过抑制TNF-α和SOCS3信号通路来抑制IRS-1 Ser307的磷酸化并促进IRTyr1150和Akt的磷酸化,从而在抑制胰岛素抵抗中发挥作用,并保护视网膜内皮细胞免受高葡萄糖诱导的细胞凋亡.

作者：刘志涛；刘刚；陈霞；王岁月

来源：安徽医药 2022 年 26卷 2期