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目的:探讨人体小动脉平滑肌细胞膜片制作方法,观察其上大电导钙激活钾通道(large-conductance calcium-activated potassium channels,BKCa)的特性.方法:将新鲜分离出的人肠系膜动脉,分离出平滑肌层,经酶解得单个平滑肌细胞.取平滑肌细胞置于含对称性高钾(K+140 mmol/L)浴液中,用膜片钳技术记录其单通道电流,输入计算机进行数据采集与分析.观察动脉平滑肌细胞三种膜片的制作过程和BKCa的特性.结果:在肠系膜动脉平滑肌细胞膜上分别形成了细胞贴附式、内面向外式、全细胞记录三种膜片.用膜片钳技术观察到急性酶分离的人体肠系膜动脉平滑肌细胞上BKCa通道具有钙敏感性:表现为胞内游离钙离子浓度增加,通道开放事件数目增加;电压依赖性:表现为随着膜电位的增加,通道开放事件数逐渐增加;电导值大:本实验的电导值为198.6±38.09 pS;应用TEA+为50 mmol/L时通道活动完全阻断.结论:人体肠系膜动脉平滑肌细胞上BKCa通道具有钙敏感性、电压依赖性、大电导、TEA+敏感特性.

作者:杜金广;李忠稳;王熙斌;唐显玲

来源:蚌埠医学院学报 2004 年 29卷 2期

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作者:
杜金广;李忠稳;王熙斌;唐显玲
来源:
蚌埠医学院学报 2004 年 29卷 2期
标签:
肌/生理学 膜片钳 钾通道,钙激活
目的:探讨人体小动脉平滑肌细胞膜片制作方法,观察其上大电导钙激活钾通道(large-conductance calcium-activated potassium channels,BKCa)的特性.方法:将新鲜分离出的人肠系膜动脉,分离出平滑肌层,经酶解得单个平滑肌细胞.取平滑肌细胞置于含对称性高钾(K+140 mmol/L)浴液中,用膜片钳技术记录其单通道电流,输入计算机进行数据采集与分析.观察动脉平滑肌细胞三种膜片的制作过程和BKCa的特性.结果:在肠系膜动脉平滑肌细胞膜上分别形成了细胞贴附式、内面向外式、全细胞记录三种膜片.用膜片钳技术观察到急性酶分离的人体肠系膜动脉平滑肌细胞上BKCa通道具有钙敏感性:表现为胞内游离钙离子浓度增加,通道开放事件数目增加;电压依赖性:表现为随着膜电位的增加,通道开放事件数逐渐增加;电导值大:本实验的电导值为198.6±38.09 pS;应用TEA+为50 mmol/L时通道活动完全阻断.结论:人体肠系膜动脉平滑肌细胞上BKCa通道具有钙敏感性、电压依赖性、大电导、TEA+敏感特性.