目的:观察RNA干扰(RNAi)对胆囊癌GBC-SD细胞株中上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EP-CAM)表达的抑制作用.方法:针对EP-CAM基因的不同位点构建4个miRNA重组质粒.经DNA测序后,用LipofectamineTM 2000 介导转染人胆囊癌GBC-SD细胞株,48 h后用RT-PCR和Western blot检测EP-CAM的mRNA和蛋白的表达变化情况.結果:经测序分析证实,靶向EP-CAM的4个miRNA重组质粒均构建成功.RT-PCR及Western Blot技术显示,4个重组质粒均不同程度地抑制靶基因EP-CAM的表达.结论:针对人EP-CAM基因的miRNA表达载体能有效地下调GBC-SD细胞中EP-CAM mRNA及蛋白的表达.
作者：贾兴胜；刘会春；张军
来源：蚌埠医学院学报 2010 年 35卷 9期
