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目的:探讨miR-31对人角质形成细胞系HaCaT细胞增殖和凋亡的影响以及可能机制.方法:培养HaCaT细胞,利用瞬时转染的方法,对不同组细胞进行转染.反义寡核苷酸技术(ASO)组:转染微小RNA(miR)-31 ASO;对照ASO组:转染对照ASO;空白对照组:转染空白质粒.MTT法检测不同转染组细胞增殖情况,Annexin V-FITC/PI双染色检测不同转染组细胞凋亡情况,PI单染色法检测不同转染组细胞周期,Western blotting检测不同转染组细胞中Rho相关结构域BTB蛋白质1(RhoBTB1)蛋白表达.结果:ASO组细胞中miR-31表达量明显低于对照ASO组和空白对照组(P<0.01);ASO组细胞在24、48、72、96 h时吸光度值均低于对照ASO组和空白对照组(P<0.05~P<0.01),且3组细胞随着时间推移,吸光度值均较之前逐渐增加(P<0.01);ASO组细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例、RhoBTB1蛋白表达量明显高于对照ASO组和空白对照组(P<0.01);而S期和G2期细胞比例明显低于对照ASO组和空白对照组(P<0.01).结论:miR-31可能参与了人角质形成细胞系HaCaT细胞增殖、凋亡过程,可能通过调控RhoBTB1蛋白表达而实现这一生物学过程.

作者:石娴;石年

来源:蚌埠医学院学报 2020 年 45卷 3期

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作者:
石娴;石年
来源:
蚌埠医学院学报 2020 年 45卷 3期
标签:
微小RNA 人角质形成细胞 反义寡核苷酸技术 细胞增殖 细胞凋亡
目的:探讨miR-31对人角质形成细胞系HaCaT细胞增殖和凋亡的影响以及可能机制.方法:培养HaCaT细胞,利用瞬时转染的方法,对不同组细胞进行转染.反义寡核苷酸技术(ASO)组:转染微小RNA(miR)-31 ASO;对照ASO组:转染对照ASO;空白对照组:转染空白质粒.MTT法检测不同转染组细胞增殖情况,Annexin V-FITC/PI双染色检测不同转染组细胞凋亡情况,PI单染色法检测不同转染组细胞周期,Western blotting检测不同转染组细胞中Rho相关结构域BTB蛋白质1(RhoBTB1)蛋白表达.结果:ASO组细胞中miR-31表达量明显低于对照ASO组和空白对照组(P<0.01);ASO组细胞在24、48、72、96 h时吸光度值均低于对照ASO组和空白对照组(P<0.05~P<0.01),且3组细胞随着时间推移,吸光度值均较之前逐渐增加(P<0.01);ASO组细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例、RhoBTB1蛋白表达量明显高于对照ASO组和空白对照组(P<0.01);而S期和G2期细胞比例明显低于对照ASO组和空白对照组(P<0.01).结论:miR-31可能参与了人角质形成细胞系HaCaT细胞增殖、凋亡过程,可能通过调控RhoBTB1蛋白表达而实现这一生物学过程.