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目的 研究单采血小板来源外泌体提取和鉴定的常见影响因素,为后续开展单采血小板来源外泌体研究提供参考.方法 利用超速离心法分离提取单采血小板来源外泌体,并通过透射电镜、Westem Blotting验证提取产物;利用BCA试剂盒测定外泌体总蛋白浓度.结果 5天组外泌体蛋白浓度(1822.2±11.4μg/mL)明显高于1天组(775.7±11.5μg/mL),P <0.001;未冻存组蛋白浓度(1822.2±11.4μg/mL)明显高于不含DMSO冻存组(1153.6 ±2.6μg/mL)和含5% DMSO冻存组(1403.4±6.1 μg/mL),P<0.001.结论 单采血小板来源外泌体含量随标本保存时间延长逐渐增加;冻存处理会一定程度上降低外泌体提取产量和影响其形态观察.

作者:程福;杨璐;李小飞;陈洁;杨鑫;黄远帅;汪德清

来源:标记免疫分析与临床 2019 年 26卷 2期

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作者:
程福;杨璐;李小飞;陈洁;杨鑫;黄远帅;汪德清
来源:
标记免疫分析与临床 2019 年 26卷 2期
标签:
单采血小板 外泌体提取与鉴定 超速离心法
目的 研究单采血小板来源外泌体提取和鉴定的常见影响因素,为后续开展单采血小板来源外泌体研究提供参考.方法 利用超速离心法分离提取单采血小板来源外泌体,并通过透射电镜、Westem Blotting验证提取产物;利用BCA试剂盒测定外泌体总蛋白浓度.结果 5天组外泌体蛋白浓度(1822.2±11.4μg/mL)明显高于1天组(775.7±11.5μg/mL),P <0.001;未冻存组蛋白浓度(1822.2±11.4μg/mL)明显高于不含DMSO冻存组(1153.6 ±2.6μg/mL)和含5% DMSO冻存组(1403.4±6.1 μg/mL),P<0.001.结论 单采血小板来源外泌体含量随标本保存时间延长逐渐增加;冻存处理会一定程度上降低外泌体提取产量和影响其形态观察.