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目的 建立基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术的志贺菌快速检测方法.方法 针对志贺菌特异保守ipaH基因设计引物,通过引物筛选和反应条件优化,建立检测志贺菌的实时荧光及肉眼目视观测结果的LAMP方法,对方法的检出限、有无交叉反应、符合率和抗干扰能力进行评价.结果 60~65℃等温条件下30min内可完成LAMP反应.荧光和肉眼目视观察结果检出限分别为211和21.1 fg/μL,与22种非志贺菌无交叉反应.检测35份志贺菌污染的样品和30份未污染标品,荧光和肉眼目视检测阳性符合率分别为97.1%和94.3%,阴性符合率均为100%,总符合率分别为98.5%和96.9%.方法 具备良好的抗干扰能力.结论 在基层医院、灾区救治、感染事件现场,环境、设备和人员受限等条件下,建立的实时荧光和肉眼目视观察结果的LAMP方法可为志贺菌快速检测提供有力手段.

作者:欧红玲;王岩;白静;张巧云;贾连玲;李梦文;冯鑫鑫;王欣茹

来源:标记免疫分析与临床 2021 年 28卷 5期

知识库介绍

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作者:
欧红玲;王岩;白静;张巧云;贾连玲;李梦文;冯鑫鑫;王欣茹
来源:
标记免疫分析与临床 2021 年 28卷 5期
标签:
环介导等温扩增 志贺菌 快速检测
目的 建立基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术的志贺菌快速检测方法.方法 针对志贺菌特异保守ipaH基因设计引物,通过引物筛选和反应条件优化,建立检测志贺菌的实时荧光及肉眼目视观测结果的LAMP方法,对方法的检出限、有无交叉反应、符合率和抗干扰能力进行评价.结果 60~65℃等温条件下30min内可完成LAMP反应.荧光和肉眼目视观察结果检出限分别为211和21.1 fg/μL,与22种非志贺菌无交叉反应.检测35份志贺菌污染的样品和30份未污染标品,荧光和肉眼目视检测阳性符合率分别为97.1%和94.3%,阴性符合率均为100%,总符合率分别为98.5%和96.9%.方法 具备良好的抗干扰能力.结论 在基层医院、灾区救治、感染事件现场,环境、设备和人员受限等条件下,建立的实时荧光和肉眼目视观察结果的LAMP方法可为志贺菌快速检测提供有力手段.