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目的 根据流式细胞仪的结构和原理,结合淋巴细胞亚群表面抗原的分布特点,设计新的流式细胞检测荧光抗体标记组合方案,以简化操作步骤,减少操作失误,降低试验成本.方法 在组合方案CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PE-Cy5中加入CD19-FITC,则PE-Cy5和FITC双阳性细胞为CD4+T淋巴细胞,PE-Cy5阴性而FITC阳性细胞为B淋巴细胞.结果 新组合方案与原方案比较,新方案重复性和准确度不劣于原方案;CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+细胞频率检测结果及CD4/CD8比值比较,差异均无统计学意义(P>0.05);经相关关系分析,两种方案5对数据均高度相关(r>0.95);组内相关系数分析提示两种方案数据具有一致性;Bland-Altman分析法分析提示两种方案数据具有一致性.结论 新方法可以一次实验替代原需两次实验或多种染料的方法,并可节省出一条荧光通道,降低了流式技术检测成本,并可减少实验失误.

作者:班玉梅;霍伟;赵萌;赵茗

来源:标记免疫分析与临床 2021 年 28卷 7期

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作者:
班玉梅;霍伟;赵萌;赵茗
来源:
标记免疫分析与临床 2021 年 28卷 7期
标签:
流式细胞术 淋巴细胞亚群 T淋巴细胞 T淋巴细胞亚群 B淋巴细胞
目的 根据流式细胞仪的结构和原理,结合淋巴细胞亚群表面抗原的分布特点,设计新的流式细胞检测荧光抗体标记组合方案,以简化操作步骤,减少操作失误,降低试验成本.方法 在组合方案CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PE-Cy5中加入CD19-FITC,则PE-Cy5和FITC双阳性细胞为CD4+T淋巴细胞,PE-Cy5阴性而FITC阳性细胞为B淋巴细胞.结果 新组合方案与原方案比较,新方案重复性和准确度不劣于原方案;CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+细胞频率检测结果及CD4/CD8比值比较,差异均无统计学意义(P>0.05);经相关关系分析,两种方案5对数据均高度相关(r>0.95);组内相关系数分析提示两种方案数据具有一致性;Bland-Altman分析法分析提示两种方案数据具有一致性.结论 新方法可以一次实验替代原需两次实验或多种染料的方法,并可节省出一条荧光通道,降低了流式技术检测成本,并可减少实验失误.