目的:分离并克隆大鼠吗啡依赖相关基因.方法:SD大鼠用递增剂量的吗啡作皮下注射,形成吗啡依赖的动物模型.分离鼠脑的中脑导水管周围灰质、伏核、纹状体等核团,提取总RNA,用mRNA差异显示(differential display PCR,DDPCR)的方法,筛选吗啡依赖大鼠特异表达产物的cDNA片段.用3组锚定引物(T12MN,M=A,G,T或C,N＝A,C或G)和6组随机引物(AP1～AP6)作不同组合进行PCR扩增.结果:获得了80余个差异表达产物的cDNA片段,经斑点杂交初步筛选,克隆了10个阳性片段,选取4个克隆进行序列分析,获得了4个cDNA片段.结论:通过BLAST数据库序列比较,现已确认获得了4个吗啡依赖表达的新基因片段.
作者：崔振中；梁德勇；金蕾；罗非；王晓民；韩济生
来源：北京医科大学学报 1999 年 31卷 3期
