目的:为细胞凋亡研究提供快速可靠的实验方法。方法:利用RT-PCR技术从人外周血单核细胞系U937 cDNA文库中扩增出编码钙依赖性磷脂结合蛋白Ⅴ(Annexin Ⅴ) cDNA,并克隆到大肠杆菌表达载体中,在大肠杆菌中表达含凝血酶识别序列的MS2 Annexin Ⅴ融合蛋白。表达产物经凝血酶消化,可除去MS2细菌蛋白,再经离子交换层析纯化,可得成熟的Annexin Ⅴ纯品,FITC标记后的Annexin Ⅴ可用于细胞凋亡的检测。结果:在大肠杆菌表达的人重组Annexin Ⅴ占菌体蛋白的56
作者:狄春辉;施群;张颖妹;赵辰;钟英成;黄大无;马大龙
来源:北京大学学报(医学版) 2001 年 33卷 2期