目的：初步研究纳米羟基磷灰石对人脂肪间充质干细胞（human adipose-derived mesenchymal stem cells， hASCs）共混物三维生物打印体细胞增殖和成骨分化的影响。方法：以 P5代 hASCs 作为种子细胞，将10 g／L 纳米羟基磷灰石加入细胞-海藻酸钠-明胶共混物（20 g／L 海藻酸钠，80 g／L 明胶，细胞密度约为1×106个／mL）混合后进行三维生物打印，作为实验组；另将细胞-海藻酸钠-明胶共混物直接进行三维生物打印，作为对照组。在打印后的既定时间点上，对实验组和对照组分别进行显微镜观察、CCK-8检测、Western blot 检测和 PCR 检测，分析打印体细胞增殖能力和成骨分化能力。结果：显微镜观察和 CCK-8检测结果显示，实验组和对照组打印体内细胞在打印完成后24 h 和7 d 均呈现良好的增殖能力。Western blot 结果显示，在打印完成后14 d，实验组和对照组的 Runt 相关转录因子（Runt-related transcription factor 2，RUNX2）蛋白水平差异无统计学意义。PCR 结果显示，在打印完成后14 d，实验组的成骨相关基因 RUNX2、osterix（OSX）和骨钙素（osteocalcin，OCN）表达明显高于对照组。结论：纳米羟基磷灰石加入后，打印体内细胞仍具有良好的增殖性，且打印体的体外成骨分化能力得到了增强。
作者：宋杨；王晓飞；王宇光；董凡；吕培军
来源：北京大学学报（医学版） 2016 年 48卷 5期
