目的:获得人重组可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rsTRAIL)蛋白,并探讨其应用于非小细胞肺癌(NSCLC)治疗的前景.方法:RT-PCR从外周血单核细胞(PBMCs)中获取目的基因片段,构建重组质粒PQEh30-TRAIL并转化人大肠杆菌(E.coli)M15,IPTG诱导目的蛋白表达并经镍固定金属亲和层析纯化,MTT法检测细胞增殖情况,荧光显微镜观察H460wt细胞的形态学改变,流式细胞仪检测其凋亡率.结果:获得与GenBank中报道一致的TRAIL基因片段.SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析显示,获得具有TRAIL免疫原性、相对分子质量约为21 000目的蛋白.Ni2+-NTA agarose纯化得到单一条带蛋白.rsTRAIL处理H460wt细胞24 h后,细胞凋亡率为43.2
作者：刘磊；方艳秋；许淑芬；谭岩
来源：吉林大学学报（医学版） 2008 年 34卷 2期
