目的:探讨骨桥蛋白(OPN)反义基因对食管癌细胞增殖和转移的影响,为食管癌基因治疗提供理论依据.方法:PCR扩增获得人OPN基因,连接pcDNA3.1(+)载体,酶切、测序.脂质体介导将pcDNA3.1-ANOPN基因转入ECA 109,G418筛选获得稳定表达ANOPN基因的转染细胞ECA-ANOPN、表达空载体的ECA-vect细胞及空白对照ECA.RT-PCR检测ANOPN mRNA、免疫组织化学检测ANOPN基因蛋白表达.体外观察各组细胞生长速度、倍增时间,Transwell小室法检测细胞黏附、侵袭迁移能力的差异.结果:载体构建正确,测序结果与GenBank中公布的序列同源性为100
作者:徐沛然;杨志广;姚宪章;邵国光
来源:吉林大学学报(医学版) 2008 年 34卷 2期