目的：应用反义寡核苷酸（ASODN）技术靶向抑制生存素（survivin）基因，研究其对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响，阐明 survivin反义寡核苷酸（survivin-ASODN）促进 SMMC-7721细胞凋亡的作用机制。方法：设计合成 survivin-ASODN 序列（FAM 荧光素标记）。利用脂质体介导法分别用浓度为100、200、300、400和600 nmol·L-1 survivin-ASODN转染 SMMC-7721细胞（ASODN转染组），并设空白对照组、空脂质体对照组和正义寡核苷酸（SODN）对照组。应用流式细胞术（FCM）检测不同浓度 survivin-ASODN体外转染 SMMC-7721细胞24、48和72 h 后 SMMC-7721细胞凋亡率及细胞周期；Western blotting 法检测survivin蛋白表达水平。结果：与各对照组比较，荧光素标记的 ASODN转染 SMMC-7721细胞24 h后，细胞生长开始受到抑制，细胞凋亡率增加，呈现剂量-时间依赖性（P＜0.05）；作用48 h后， ASODN 转染组细胞在G1期前出现明显的亚二倍体凋亡峰，G0/G1期细胞明显减少（P＜0.05），G2/M期细胞显著增加（P＜0.05），细胞被阻滞于 G2/M期。与各对照组比较，不同浓度 ASODN转染组 SMMC-7721细胞 survivin蛋白表达水平下降（P＜0.05），且随作用时间的延长而降低（P＜0.05）。结论：survivin-ASODN 通过抑制 survivin蛋白表达、

作者：齐亚灵；赵文杰；方艳秋；陈玉强；孟德欣；王伟群；李尧；李文

来源：吉林大学学报（医学版） 2014 年 4期