目的:应用小干扰RNA(siRNA)沉默树突状细胞(DCs) CD40分子的表达,观察其对大鼠炎症性肠病(IBD)的影响.方法:设计并合成高效的siRNA载体及真核表达载体pcDNA3-CD40,分别转染入大鼠DCs细胞.采用PCR和Western blotting法检测DCs中CD40 mRNA及蛋白表达水平.18只Wistar大鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)建立IBD大鼠模型,分为对照组、干预组及过表达组.对照组大鼠给予生理盐水腹腔注射;干预组大鼠给予含有干涉表达载体pSilencer 4.1-CMV neo-CD40的DCs腹腔注射;过表达组大鼠给予含有pcDNA3-CD40的DCs腹腔注射.15d后观察各组大鼠的腹泻、黏液脓血便等临床症状.结果:成功构建RNA干涉载体并转染DCs,PCR及Western blotting法检测DCs中CD40 mRNA及蛋白表达水平均下调.转染后的DCs作用于各组大鼠,与对照组比较,干预组大鼠的腹泻、黏液脓血便症状得到明显改善;过表达组大鼠腹泻、黏液脓血便情况加重,并有2只大鼠死亡.结论:siRNA干预DCs中CD40分子的表达对大鼠IBD具有治疗作用.
作者:王丽英;杨勇;李占东;李东复;刘力宾;王敏
来源:吉林大学学报(医学版) 2015 年 41卷 1期