目的:探讨小鼠骨髓来源的内皮祖细胞(EPCs)条件培养基(CM)对同源间充质干细胞(MSCs)增殖和成骨分化功能的影响,并阐明其作用机制.方法:小鼠骨髓细胞经差速贴壁法结合专用培养基分别培养扩增MSCs和EPCs,采用流式细胞术(FCM)检测MSCs和EPCs表面标记物,以成骨、成脂和成软骨诱导分化对MSCs进行功能鉴定,以成血管对EPCs进行功能鉴定.将MSCs分为0％ EPCs-CM组(对照组,采用LG-DMEM培养)、50％ EPCs-CM组(采用50％ EPCs-CM+50％ LG-DMEM培养)和100％ EPCs-CM组(采用100％ EPCs-CM培养).采用MTT比色法检测各组MSCs的增殖活性;采用茜素红染色检测各组MSCs的成骨分化能力.结果:FCM法检测,第3代MSCs高表达Sea-1、CD29,低表达CD45、CD11b;经诱导可向成骨、成软骨和成脂方向分化.第3代EPCs高表达CD34、CD133和VEGFR2;在铺有基质胶的96孔培养板中可形成血管样结构.与对照组比较,50％ EPCs-CM组和100％ EPCs-CM组MSCs增殖活性明显增加,且呈浓度依赖性(P＜0.05).茜草色素红染色法检测,培养21 d后50％和100％ EPCs-CM组MSCs的钙结节数量和钙盐沉积均高于对照组(P＜0.05).结论:利用差速贴壁法可同时分离MSCs和EPCs,EPCs-CM能促进MSCs的增殖和成骨分化.
作者：冯文磊；张猛；徐芳洁；印双红；王艳杰；陈雪玲；吴向未
来源：吉林大学学报（医学版） 2015 年 41卷 2期
