目的：构建靶向血管紧张素原（AGT）基因的 RNA 干扰质粒，研究 AGT 基因对鼠前脂肪3T3-L1分化的影响。方法：设计靶向 AGT 的小分子 RNA 干扰片段（AGT-shRNA），以未靶向任何 DNA 的小分子RNA （Non-shRNA）为对照，利用载体 psiRNA-U6.1／Neo 构建重组表达质粒，转染鼠前脂肪细胞3T3-L1并筛选到稳定转染细胞株，RT-PCR 和 SDS-PAGE 法分别检测 AGT 基因沉默效果，通过显微镜观察和脂肪细胞分化标志物检测来确定 AGT 基因干扰对3T3-L1细胞分化的影响。结果：成功构建 AGT 干扰质粒，与对照组比较， AGT 基因转录水平受到显著抑制（P ＜0.05），AGT 蛋白表达水平也仅为对照的43.86％。AGT 基因干扰后3T3-L1细胞脂质水平和甘油-3-磷酸脱氢酶（GPDH）活性仍随分化时间延长呈上升趋势，但增长量明显低于对照组（P ＜0.05）。结论：RNA 干扰 AGT 基因可明显抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化，提示脂肪组织中的肾素-血管紧张素系统（RAS）与脂肪代谢有重要关联。
作者：黄志立；张丽君；伍丽华；王妍；杨汝德
来源：吉林大学学报（医学版） 2015 年 6期
