目的:探讨骨髓源内皮祖细胞分泌的外泌体(EPCs-Exos)对血管新生和胶原沉积的作用,阐明其促进皮肤伤口愈合的可能机制.方法:分离、培养并鉴定内皮祖细胞(EPCs),同时分离并鉴定EPCs-Exos.观察分析EPCs摄取EPCs-Exos.16只大鼠随机分为4组,建立皮肤缺损模型,分别将等量的PBS,50、100和150 mg·L-1EPCs-Exos分别注射至4组大鼠的皮肤缺损周围区域.在0、3、7和14 d测量各组大鼠伤口闭合区域的范围;14 d时取愈合区组织进行Masson三色染色及CD31免疫荧光染色,评估EPCs-Exos的治疗效果.在体外,将含有PBS,50、100和150 mg·L-1EPCs-Exos培养基和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)共培养,利用划痕实验和成管实验检测HUVECs的迁移和毛细血管网的形成.应用Western blotting法检测HUVECs中促血管生成相关基因血管内皮生长因子A(VEGFA)表达水平.结果:成功分离并鉴定原代EPCs,EPCs 的CD31免疫荧光染色、DiL-ac-LDL和FITC-UEA-I双染均呈阳性.电镜观察EPCs-Exos形态为近圆形,直径为40~100 nm.在注射EPCs-Exos的大鼠皮肤损伤模型中,随着注射剂量增大,皮肤缺损疤痕直径逐渐缩小,疤痕愈合度逐渐增加,组间比较差异有统计学意义(P<0.05).EPCs-Exos呈剂量依赖性促进愈合皮肤组织胶原的成熟,14 d时150 mg·L-1EPCs-Exos注射组最明显.在体外
作者:徐兵;李海乐;刘丹平;张凤蔚
来源:吉林大学学报(医学版) 2017 年 43卷 4期