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目的:探讨丹参酮ⅡA (TanⅡA) 对人胎盘间充质干细胞 (hPDMSCs) 向心肌细胞分化的诱导作用及其机制, 为TanⅡA作为心肌细胞分化诱导剂提供实验依据.方法:采用不同浓度TanⅡA (0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0 mg·L-1) 处理hPDMSCs, MTT法筛选出无毒剂量的TanⅡA (0.1mg·L-1) 用于实验.hPDMSCs培养体系分为对照组、5-氮胞苷 (5-aza, 10μmol·L-1) 诱导组和TanⅡA (0.1mg·L-1) 诱导组.培养20d后, 免疫组织化学法检测各组细胞中α-横纹肌肌动蛋白 (α-SCA) 的表达;免疫荧光法检测各组细胞中心肌肌钙蛋白I (cTnI) 的阳性表达率, 计算心肌细胞分化率;Westernblotting法检测各组细胞中心肌转录调节因子4 (GATA4) 、心钠素 (ANF) 、cTnI、糖原合成酶激酶-3β (GSK-3β) 和β-连环蛋白 (β-catenin) 的蛋白表达水平.结果:hPDMSCs的生物学特性符合间充质干细胞.MTT法, 当TanⅡA浓度大于0.1mg·L-1时, 细胞存活率随浓度的增加而降低.对照组细胞在培养12d以前呈快速增长趋势, 培养12d后细胞增殖活性降低;与对照组比较, 5-aza诱导组和TanⅡA诱导组细胞增殖活性明显降低 (P<0.05) .免疫组织化学染色, 对照组细胞不表达α-SCA, 5-aza诱导组和TanⅡA诱导组细胞均表达α-SCA, 且TanⅡA诱导

作者:王秀艳;樊晨星;赵千;王博;袁松;李昆

来源:吉林大学学报(医学版) 2019 年 45卷 1期

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作者:
王秀艳;樊晨星;赵千;王博;袁松;李昆
来源:
吉林大学学报(医学版) 2019 年 45卷 1期
标签:
丹参酮ⅡA 人胎盘间充质干细胞 细胞分化 心肌细胞 tanshinone ⅡA human placenta-derived mesenchymal stem cells cell differentiation cardiomyocytes
目的:探讨丹参酮ⅡA (TanⅡA) 对人胎盘间充质干细胞 (hPDMSCs) 向心肌细胞分化的诱导作用及其机制, 为TanⅡA作为心肌细胞分化诱导剂提供实验依据.方法:采用不同浓度TanⅡA (0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0 mg·L-1) 处理hPDMSCs, MTT法筛选出无毒剂量的TanⅡA (0.1mg·L-1) 用于实验.hPDMSCs培养体系分为对照组、5-氮胞苷 (5-aza, 10μmol·L-1) 诱导组和TanⅡA (0.1mg·L-1) 诱导组.培养20d后, 免疫组织化学法检测各组细胞中α-横纹肌肌动蛋白 (α-SCA) 的表达;免疫荧光法检测各组细胞中心肌肌钙蛋白I (cTnI) 的阳性表达率, 计算心肌细胞分化率;Westernblotting法检测各组细胞中心肌转录调节因子4 (GATA4) 、心钠素 (ANF) 、cTnI、糖原合成酶激酶-3β (GSK-3β) 和β-连环蛋白 (β-catenin) 的蛋白表达水平.结果:hPDMSCs的生物学特性符合间充质干细胞.MTT法, 当TanⅡA浓度大于0.1mg·L-1时, 细胞存活率随浓度的增加而降低.对照组细胞在培养12d以前呈快速增长趋势, 培养12d后细胞增殖活性降低;与对照组比较, 5-aza诱导组和TanⅡA诱导组细胞增殖活性明显降低 (P<0.05) .免疫组织化学染色, 对照组细胞不表达α-SCA, 5-aza诱导组和TanⅡA诱导组细胞均表达α-SCA, 且TanⅡA诱导