目的:探讨孟鲁司特钠(Mon)对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖和凋亡及炎症因子分泌的影响,阐明哮喘大鼠气道重塑及炎症反应的分子机制.方法:采用卵清蛋白致敏和激发构建急性哮喘大鼠模型,原代培养大鼠气道平滑肌细胞,取第5代细胞用于实验.实验分为对照组(正常气道平滑肌细胞)、模型组(哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞)和治疗组(哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞+ Mon干预).采用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测各组细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)和转化生长因子β1(TGF-β1)水平,Western blotting法检测各组细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1 (CyclinD1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Toll样受体4(TLR4)和核因子κB (NF-κB) p65蛋白表达水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞中TLR4和NF-κB p65 mRNA表达水平.结果:与对照组比较,模型组和治疗组细胞活性明显升高(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05),IL-6和TGF-β1水平升高(P<0.05),PCNA、CyclinD1、Bcl-2、TLR4和NF-κB p65蛋白表达水平及TLR4和NF-κB p65 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05),而Bax蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,治疗组细胞增殖活
作者:王亚洲;何鹏;王丹虹
来源:吉林大学学报(医学版) 2020 年 46卷 2期