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目的:探讨微小RNA-107(miR-107)通过丝裂原活化蛋白3激酶7(MAP3K7)调控卵巢癌细胞免疫逃逸对紫杉醇(TAX)耐药性的影响,并阐明其作用机制.方法:293T细胞分为miRNC组(转染miR-NC)和miR-107 mimics组(转染miR-107 mimics).采用浓度梯度递增法处理卵巢癌SKOV3细胞,获得TAX耐药细胞SKOV3/TAX.SKOV3/TAX细胞随机分为空白对照组、TAX(给予4.0μmol·L-1 TAX)组、TAX+miR-107 mimics(给予4.0μmol·L-1 TAX且转染miR-107mimics)组和TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7(给予4.0μmol·L-1 TAX且转染miR-107mimics和pcDNA-MAP3K7)组;分别与人外周血淋巴细胞HPBL共培养,分为HPBL组、HPBL+SKOV3/TAX组、HPBL+SKOV3/TAX+TAX组、HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics组和HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测细胞中miR-107表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-107和MAP3K7的靶向关系,Western blotting法检测各组细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平,CCK-8法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率.结果:与人卵巢上皮细胞HOSEpic比较,卵巢癌细胞中miR-107表达水平降低(P<0.05).MAP3K7的3′-UTR与miR-107存在靶向结合位点.双荧光素酶报告基因实验,与miR-NC组比较,过表

作者:王青慧;李波;胡传翠;聂明朝;郑小妹

来源:吉林大学学报(医学版) 2022 年 48卷 3期

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作者:
王青慧;李波;胡传翠;聂明朝;郑小妹
来源:
吉林大学学报(医学版) 2022 年 48卷 3期
标签:
卵巢肿瘤 微小RNA-107 免疫逃逸 紫杉醇 耐药
目的:探讨微小RNA-107(miR-107)通过丝裂原活化蛋白3激酶7(MAP3K7)调控卵巢癌细胞免疫逃逸对紫杉醇(TAX)耐药性的影响,并阐明其作用机制.方法:293T细胞分为miRNC组(转染miR-NC)和miR-107 mimics组(转染miR-107 mimics).采用浓度梯度递增法处理卵巢癌SKOV3细胞,获得TAX耐药细胞SKOV3/TAX.SKOV3/TAX细胞随机分为空白对照组、TAX(给予4.0μmol·L-1 TAX)组、TAX+miR-107 mimics(给予4.0μmol·L-1 TAX且转染miR-107mimics)组和TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7(给予4.0μmol·L-1 TAX且转染miR-107mimics和pcDNA-MAP3K7)组;分别与人外周血淋巴细胞HPBL共培养,分为HPBL组、HPBL+SKOV3/TAX组、HPBL+SKOV3/TAX+TAX组、HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics组和HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测细胞中miR-107表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-107和MAP3K7的靶向关系,Western blotting法检测各组细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平,CCK-8法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率.结果:与人卵巢上皮细胞HOSEpic比较,卵巢癌细胞中miR-107表达水平降低(P<0.05).MAP3K7的3′-UTR与miR-107存在靶向结合位点.双荧光素酶报告基因实验,与miR-NC组比较,过表