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目的 探讨5-氮-2'-脱氧胞嘧啶(5-Aza-CdR)诱导骨髓瘤细胞系U266p16基因DNA5'CpG岛去甲基化作用及对U266细胞增生的影响.方法 采用巢式甲基特异性PCR法(n-MSP)、DNA序列分析、RT-PCR、细胞生长曲线、流式细胞仪DNA含量分析法检测5-Aza-CdR对U266细胞p16基因去甲基化作用及其对U266细胞的生长、增生及细胞周期的影响.结果 (1)5-Aza-CdR能够逆转U266细胞p16基因异常甲基化;(2)5-Aza-CdR能激活p16基因沉默的再转录;(3)5-Aza-CdR能下调U266细胞甲基转移酶DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的表达并呈浓度依赖性;(4)5-Aza-CdR作用的U266细胞被阻滞于G0~G1期.结论 5-Aza-CdR可能通过抑制甲基转移酶直接对p16基因去甲基化,逆转U266细胞DNA异常甲基化,并有效地激活因高甲基化所致p16基因沉默的再转录.

作者:付海英;沈建箴;叶宝国;沈松菲;周华蓉;范丽萍;林福安

来源:白血病·淋巴瘤 2007 年 16卷 2期

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作者:
付海英;沈建箴;叶宝国;沈松菲;周华蓉;范丽萍;林福安
来源:
白血病·淋巴瘤 2007 年 16卷 2期
标签:
多发性骨髓瘤 细胞系 基因表达调控 基因,肿瘤,抑制
目的 探讨5-氮-2'-脱氧胞嘧啶(5-Aza-CdR)诱导骨髓瘤细胞系U266p16基因DNA5'CpG岛去甲基化作用及对U266细胞增生的影响.方法 采用巢式甲基特异性PCR法(n-MSP)、DNA序列分析、RT-PCR、细胞生长曲线、流式细胞仪DNA含量分析法检测5-Aza-CdR对U266细胞p16基因去甲基化作用及其对U266细胞的生长、增生及细胞周期的影响.结果 (1)5-Aza-CdR能够逆转U266细胞p16基因异常甲基化;(2)5-Aza-CdR能激活p16基因沉默的再转录;(3)5-Aza-CdR能下调U266细胞甲基转移酶DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的表达并呈浓度依赖性;(4)5-Aza-CdR作用的U266细胞被阻滞于G0~G1期.结论 5-Aza-CdR可能通过抑制甲基转移酶直接对p16基因去甲基化,逆转U266细胞DNA异常甲基化,并有效地激活因高甲基化所致p16基因沉默的再转录.