目的:观察益气除痰方含药血清对肺腺癌A549细胞失巢凋亡的诱导作用以及对P-akt、P-p38蛋白以及下游凋亡相关基因表达的影响.方法:采用软琼脂集落培养实验和poly-HEMA培养检测含药血清对锚定不依赖性增殖和失巢凋亡影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测含药血清对P-akt、P-p38蛋白的影响,RT-PCR测定用药前后调亡相关基因mRNA表达的变化.结果:培养10 d左右,A549细胞在软琼脂可形成明显集落,低、中、高剂量含药血清及阳性组细胞集落形成数较阴性组明显减少(P＜0.05);流式细胞仪检测显示,阴性对照组,低、中、高剂量药物组,阳性对照组凋亡率分别为0.57±0.40％,10.23±1.46％、16.30±0.96％、27.10±1.22％,45.80±1.45％,差异有统计学意义(P＜0.05);Western blot结果显示:与阴性组相比较,低、中、高剂量组,P-p38蛋白相对表达量分别为1.04、1.11、1.09,未见明显变化;而P-akt蛋白相对表达量分别为0.81、0.58、0.53,明显降低;RT-PCR显示益气除痰方可显著上调p53 mRNA、bax mRNA表达,下调bcl-2 mRNA表达.结论:益气除痰方含药血清可诱导A549失巢凋亡,其作用机制可能与降低A549细胞P-akt蛋白表达,进而调控其信号传导通路下游的凋亡相关基因p53、bcl-2、bax的表达有关,而与P-p38蛋白的调控无明显相关.
作者：周京旭；宋妮；孙玲玲；林丽珠
来源：成都中医药大学学报 2014 年 37卷 2期
