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目的 建立测定大鼠肝微粒中UGT酶底物的HPLC方法.方法 选择对硝基酚、对乙酰氨基酚作为UGT的特异性底物.采用高效液相色谱法,分别以非那西丁、咖啡因作为内标,色谱柱为Welchrom C18,体积流量为1 mL/min,柱温为30℃.对硝基酚和对乙酰氨基酚的流动相分别为乙腈-0.01 mol/L的醋酸铵缓冲液(pH5.00)=35∶65和乙腈-水=14∶86,对应的检测波长分别为316 nm和244 nm.结果 对硝基酚和对乙酰氨基酚在0.5~100 μmol/L范围内,线性关系良好.对硝基酚的日内精密度和日间精密度RSD%<14.7%,方法回收率为89.9%~111.0%,提取回收率>86.5%.对乙酰氨基酚的日内精密度和日间精密度RSD%<13.0%,方法回收率105.6%~114.2%,提取回收率>78.3%.结论 两组方法灵敏、简便、准确,可用于大鼠肝微粒体中UGT酶活性的测定.

作者:洪丽霞;吕红霞;石明芯;王佳慧;代晶

来源:成都医学院学报 2014 年 9卷 2期

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作者:
洪丽霞;吕红霞;石明芯;王佳慧;代晶
来源:
成都医学院学报 2014 年 9卷 2期
标签:
高效液相色谱法 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶 对硝基酚 对乙酰氨基酚 肝微粒体 HPLC Uridine Diphosphate Glucuronosyltransferase P-Nitrophenol Acetaminophen Liver Microsomes
目的 建立测定大鼠肝微粒中UGT酶底物的HPLC方法.方法 选择对硝基酚、对乙酰氨基酚作为UGT的特异性底物.采用高效液相色谱法,分别以非那西丁、咖啡因作为内标,色谱柱为Welchrom C18,体积流量为1 mL/min,柱温为30℃.对硝基酚和对乙酰氨基酚的流动相分别为乙腈-0.01 mol/L的醋酸铵缓冲液(pH5.00)=35∶65和乙腈-水=14∶86,对应的检测波长分别为316 nm和244 nm.结果 对硝基酚和对乙酰氨基酚在0.5~100 μmol/L范围内,线性关系良好.对硝基酚的日内精密度和日间精密度RSD%<14.7%,方法回收率为89.9%~111.0%,提取回收率>86.5%.对乙酰氨基酚的日内精密度和日间精密度RSD%<13.0%,方法回收率105.6%~114.2%,提取回收率>78.3%.结论 两组方法灵敏、简便、准确,可用于大鼠肝微粒体中UGT酶活性的测定.