目的:构建针对表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)基因的小于扰RNA(Small interference RNA,siRNA)质粒,转染人卵巢癌SKOV3细胞株后,检测RNA干扰(RNA interference,RNAi)对EGFR基因表达及评估细胞对放疗敏感性的影响.方法:体外构建EGFR小发卡状RNA(Short hairpin RNA,shRNA)的表达质粒,脂质体法转染入SKOV3细胞及G418筛选阳性克隆.实验随机分为阳性RNA干扰组(A组)、阴性RNA干扰组(B组)、空白对照组(C组).采用RT-PCR、Western Blot技术检测EGFR mRNA及其蛋白质的表达情况.分别给予不同放射剂量(0、2、4、6、8 Gy)照射,MTF法绘制细胞存活曲线.结果:靶向EGFR的序列特异性shRNA可明显抑制EGFR基因的表达,EGFR mRNA和蛋白的抑制率分别为77.5
作者：罗茜；吴永忠；林远洪；郭启帅；黄环
来源：重庆医科大学学报 2010 年 35卷 5期
