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目的:探讨大鼠硫酸基转移酶(Sulfotransferase,SULT)1A1在巯基部分氧化的状态下对某些羟基多氯联苯(Hydroxylated polychlorinated biphenyls,OH-PCBs)的特异性及酶促动力学的影响.方法:大鼠肝胞液作为大鼠SULT的天然来源,大鼠SULT1A1则从重组表达的大肠杆菌分离纯化;硫酸基结合速率以辅酶转化产物3’,5’-二磷酸腺苷的形成来测定;酶蛋白巯基氧化还原状态以氧化型/还原型谷胱甘肽(Oxidized/reduced glutathione,GSSG/GSH)对酶预处理来获得.结果:6’-OH PCB 35、4’-OH PCB 9及4’-OH PCB 12均可在大鼠肝胞液作用下形成硫酸基结合产物;4’-OH PCB 9和2-萘酚在用GSSG预处理的大鼠SULT1A1作用下的硫酸基结合速率降低而底物抑制消除;4’-OH PCB 6在该酶经GSSG预处理后由抑制剂转变为底物,且反应速率随预处理时GSH/GSSG中GSSG的比例增高而增高;4-OH PCB 14则仅在该酶经GSSG预处理后由抑制剂变为底物.结论:大鼠SULT1A1在巯基氧化后可降低OH-PCBs等底物的最大反应速度(Maximal velocity,Vmax),同时消除底物抑制;酶的巯基氧化状态使某些作为抑制剂的OH-PCBs转变为底物,其反应速率与GSSG/GSH相对量有关.

作者:刘云岗;姜浩

来源:重庆医科大学学报 2011 年 36卷 10期

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作者:
刘云岗;姜浩
来源:
重庆医科大学学报 2011 年 36卷 10期
标签:
大肠杆菌 重组硫酸基转移酶 羟基多氯联苯 氧化型谷胱甘肽
目的:探讨大鼠硫酸基转移酶(Sulfotransferase,SULT)1A1在巯基部分氧化的状态下对某些羟基多氯联苯(Hydroxylated polychlorinated biphenyls,OH-PCBs)的特异性及酶促动力学的影响.方法:大鼠肝胞液作为大鼠SULT的天然来源,大鼠SULT1A1则从重组表达的大肠杆菌分离纯化;硫酸基结合速率以辅酶转化产物3’,5’-二磷酸腺苷的形成来测定;酶蛋白巯基氧化还原状态以氧化型/还原型谷胱甘肽(Oxidized/reduced glutathione,GSSG/GSH)对酶预处理来获得.结果:6’-OH PCB 35、4’-OH PCB 9及4’-OH PCB 12均可在大鼠肝胞液作用下形成硫酸基结合产物;4’-OH PCB 9和2-萘酚在用GSSG预处理的大鼠SULT1A1作用下的硫酸基结合速率降低而底物抑制消除;4’-OH PCB 6在该酶经GSSG预处理后由抑制剂转变为底物,且反应速率随预处理时GSH/GSSG中GSSG的比例增高而增高;4-OH PCB 14则仅在该酶经GSSG预处理后由抑制剂变为底物.结论:大鼠SULT1A1在巯基氧化后可降低OH-PCBs等底物的最大反应速度(Maximal velocity,Vmax),同时消除底物抑制;酶的巯基氧化状态使某些作为抑制剂的OH-PCBs转变为底物,其反应速率与GSSG/GSH相对量有关.