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目的 研究PI3K/Akt通路对大鼠缺氧缺血皮质神经元细胞葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)转位的影响.方法 将原代培养的大鼠皮质神经元随机分为对照组、缺氧缺血组、缺氧缺血加LY294002 (PI3K特异性抑制剂)组,用Western blot检测3 h后3组细胞中PI3K/Akt磷酸化蛋白的表达,RT-PCR检测GLUT3 mRNA表达.然后利用差速离心及蔗糖密度梯度分离出细胞外膜和细胞内膜,再用Western blot法分别测定各组细胞和细胞外膜中GLUT3的表达量.结果 应用LY294002后磷酸化PI3K、磷酸化Akt (苏氨酸308)的表达均降低(P<0.01).3组间GLUT3 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05).与对照组和缺氧缺血加 LY294002组相比,缺氧缺血组大鼠皮质神经元细胞膜上GLUT3表达量均显著增高,差异有统计学意义(P<0.01),而3组间细胞GLUT3表达量无差异(P>0.05),证实神经元发生了GLUT3转位.结论 PI3K/Akt通路活化可诱导原代培养的大鼠缺氧缺血皮质神经元细胞GLUT3发生不同程度的转位,从而起到保护缺氧缺血神经元的作用.

作者:周琳;高小平;胡美伦

来源:重庆医学 2011 年 40卷 9期

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作者:
周琳;高小平;胡美伦
来源:
重庆医学 2011 年 40卷 9期
标签:
神经元 缺氧缺血,脑 葡萄糖转运蛋白质类,易化性
目的 研究PI3K/Akt通路对大鼠缺氧缺血皮质神经元细胞葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)转位的影响.方法 将原代培养的大鼠皮质神经元随机分为对照组、缺氧缺血组、缺氧缺血加LY294002 (PI3K特异性抑制剂)组,用Western blot检测3 h后3组细胞中PI3K/Akt磷酸化蛋白的表达,RT-PCR检测GLUT3 mRNA表达.然后利用差速离心及蔗糖密度梯度分离出细胞外膜和细胞内膜,再用Western blot法分别测定各组细胞和细胞外膜中GLUT3的表达量.结果 应用LY294002后磷酸化PI3K、磷酸化Akt (苏氨酸308)的表达均降低(P<0.01).3组间GLUT3 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05).与对照组和缺氧缺血加 LY294002组相比,缺氧缺血组大鼠皮质神经元细胞膜上GLUT3表达量均显著增高,差异有统计学意义(P<0.01),而3组间细胞GLUT3表达量无差异(P>0.05),证实神经元发生了GLUT3转位.结论 PI3K/Akt通路活化可诱导原代培养的大鼠缺氧缺血皮质神经元细胞GLUT3发生不同程度的转位,从而起到保护缺氧缺血神经元的作用.