目的：采用3种方法从大鼠T细胞培养上清中提取纯化exosome ，以获取高质量的exosome。方法分别采用Exo-Quick Precipitation提取法、超滤密度梯度离心法、差速离心法提取 T 细胞培养上清中的exosome。利用透射电镜进行形态学观察，2，2-联喹啉-4，4-二甲酸二钠（BCA ）法进行蛋白定量，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE ）分析蛋白表达的差异，Western blotting检测白细胞介素2（IL-2）的表达。结果3种方法均可提取出exosome；ExoQuick Precipitation 提取法、超滤密度梯度离心法所得样本浓度显著高于差速离心法所得样本浓度（P＜0．05）；SDS-PAGE结果显示3种方法所得样本具有蛋白表达强度的差异；Western blotting显示3种方法所得样本均表达IL-2。结论 ExoQuick Precipitation提取法、超滤密度梯度离心法可获得高纯度、无蛋白丢失的exosome样本。
作者：孙祯；黄赤兵；宋亚军；陈益荣；李传贵
来源：重庆医学 2013 年 29期
