目的：研究S期激酶相关蛋白2反义寡核苷酸（Skp2 antisense oligodeoxynucleotide ，Skp2 ASODN ）对大肠癌细胞生长和增殖的影响及可能机制。方法采用脂质体介导不同浓度的 Skp2 ASODN 转染 SW480细胞，终浓度分别设置0．050、0．125、0．250、0．500、1．000、2．000、4．000μmol/L ，以Skp2无义寡核苷酸（NSODN ）及空白组作对照。采用倒置显微镜观察、噻唑蓝比色法（MTT）和流式细胞术（FCM ），观察不同浓度的Skp2 ASODN 对SW480细胞生长、增殖和细胞周期的影响。运用RT-PCR和免疫细胞化学检测SW480细胞中Skp2、P27kip1 mRNA和蛋白表达情况。结果倒置显微镜下观察见SW480细胞形态未见改变，生长速度减慢。Skp2 ASODN浓度达到0．125μmol/L时，抑制率为14．48％（P＜0．05）。随着Skp2 ASODN浓度增加，其对SW480细胞的生长和增殖的抑制作用增强（P＜0．01），并存在浓度依赖效应。SW480细胞G0/G1期增多（P＜0．01），S期减少（P＜0．05），细胞周期进程受到阻滞。RT-PCR及免疫细胞化学显示：Skp2 mRNA及Skp2蛋白表达降低（P＜0．05），P27kip1 mRNA未见改变（P＞0．05），但其蛋白表达明显升高（P＜0．01）。结论 Skp2 ASODN对SW480细胞的生长和增殖具有抑制作用。其可能的机制为通过Skp2 ASODN的基

作者：聂伟；周洪伟；王继建

来源：重庆医学 2014 年 3期