目的:构建血小板源性生长因子B(PDGF-B)慢病毒载体,建立PDGF-B稳定过表达的 SGC7901胃癌细胞株并观察PDGF-B对 SGC7901胃癌细胞侵袭能力的影响。方法采用四质粒系统构建 PDGF-B慢病毒载体,转染293T细胞包装获得高滴度病毒颗粒;以病毒颗粒转染SGC7901细胞,通过荧光显微镜观察转染效果,并用免疫印迹法检测PDGF-B的蛋白表达;用Tr-answell试验观察 SGC7901细胞侵袭能力的变化。结果通过PCR及酶切鉴定成功构建 PDGF-B载体;包装并得到高滴度的病毒颗粒;成功转染 SGC7901细胞后,免疫印迹法检测到 PDGF-B蛋白表达明显升高;Transwell试验证明 PDGF-B过表达增强SGC7901细胞侵袭能力。结论成功构建并包装获得PDGF-B慢病毒颗粒,建立 PDGF-B稳定过表达 SGC7901胃癌细胞株,证明PDGF-B过表达可增强胃癌细胞侵袭转移能力。
作者:郭轶;尹江燕;卢小刚;王子卫
来源:重庆医学 2014 年 18期